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一文講述關(guān)于高效液相色譜的知識點

更新時間:2024-01-25      點擊次數(shù):1538
  高效液相色譜法是一種常用的分析方法,用于檢測物質(zhì)中的組分和含量。它通常用于分析難以用其他方法進行分離和檢測的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、糖類、有機化合物等。
 
  高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
 
  高效液相色譜法的作用主要包括分離和分析兩個方面。該方法可以用于分離和純化各種物質(zhì),如有機化合物、無機化合物、生物大分子等。同時,它也可以用于分析樣品中的各種成分,如含量、分子量、分子式等。高效液相色譜法通常用于有機酸、氨基酸、糖類、脂肪醇、蛋白質(zhì)、核酸、酶、藥物等物質(zhì)的分離和分析。
 
  定性分析和定量分析:HPLC能夠有效地進行化合物的定性分析和定量分析。它可以用來確定樣品中各組分的存在與否,并且可以準(zhǔn)確測量這些組分的含量。
 
  高效液相色譜法的工作原理是利用物質(zhì)在固定相和流動相之間的分配平衡來進行分離。該方法先將樣品溶解在流動相中,然后通過泵將流動相引入色譜柱,使樣品隨流動相通過色譜柱。在色譜柱中,樣品分子與固定相分子之間相互作用,發(fā)生吸附、解吸附等過程,使得不同的物質(zhì)在色譜柱中的移動速度不同,從而得到分離。
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