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分析色譜與制備色譜的根本區(qū)別在于分離目的不同

更新時(shí)間:2021-10-27      點(diǎn)擊次數(shù):1668
  液相色譜技術(shù)自發(fā)明以來,由于其高效、高靈敏度等特點(diǎn),得到了飛速發(fā)展。近年來,伴隨著生物技術(shù)和精細(xì)化工的發(fā)展,作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視,成為了生物技術(shù)產(chǎn)品和研究中*的手段。
  制備液相色譜按照一次進(jìn)樣量的多少,可以分為3種規(guī)模,即半制備色譜、制備色譜和工業(yè)級(jí)色譜。制備色譜以生產(chǎn)純物質(zhì)為目的,在經(jīng)濟(jì)合理的前提下,規(guī)模越大越好。
  分析色譜與制備色譜的根本區(qū)別在于分離目的不同。分析色譜,反映的是樣品的組成,追求的是高效分離和高靈敏度,不需要收集特定的餾分,洗脫液通常作為廢液來處理。但在制備色譜中,為了節(jié)省投資和操作費(fèi)用,必須以最少的時(shí)間生產(chǎn)最大量的產(chǎn)品。由于目的不同,制備色譜與分析色譜所選用的操作參數(shù),包括色譜柱尺寸、填料、流量、操作壓力、進(jìn)樣量、產(chǎn)品純度、產(chǎn)品回收率、色譜分離效果等的優(yōu)化上有較大的差別。前者要求進(jìn)樣量越小越好,而后者為了提高制備量,柱子必須超載。柱子的超載方式有兩種,一種是“質(zhì)量超載”,即維持較小的進(jìn)樣體積,提高進(jìn)樣濃度;另一種是“體積超載”,即保持較小的進(jìn)樣濃度,增加進(jìn)樣體積。在制備色譜中,一般認(rèn)為采用質(zhì)量超載的方式較好。在制備色譜分離過程中,分離度和柱效均隨著質(zhì)量超載程度的增加而下降。但是,在分離度可以滿足要求的前提下,采用質(zhì)量超載的方式操作,可以提高制備量。
  目前,主要通過線性放大的原理優(yōu)化從分析到制備過程的操作參數(shù)。通常假設(shè)分析色譜系統(tǒng)和制備色譜系統(tǒng)的化學(xué)性質(zhì)、傳質(zhì)過程都保持不變,分析型液相色譜的進(jìn)樣量、流量、收集體積等乘以線性放大系數(shù)便可得制備型液相色譜的相應(yīng)參數(shù)。線性放大系數(shù)即為制備色譜柱和分析色譜柱的截面積之比與柱長(zhǎng)之比的乘積。
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