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液相色譜儀的使用要滿(mǎn)足哪些要求?

更新時(shí)間:2021-10-19      點(diǎn)擊次數(shù):1242
  液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
  液相色譜儀的使用要求:
  1、氣泡會(huì)致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過(guò)程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
  2、如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時(shí),要使用注射器吸液:通常在輸液前要進(jìn)行流動(dòng)相的清洗。
  3、使用緩沖溶液時(shí),做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時(shí),然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對(duì)于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
  4、長(zhǎng)時(shí)間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機(jī)相(如,甲醇等),因?yàn)?,純水易長(zhǎng)霉。
  5、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品,特別是堿性樣品。
  6、更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊靖洗,然后插入新的流動(dòng)相中。更換無(wú)互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過(guò)渡一下。
  7、流動(dòng)相必須用HPLC級(jí)的試劑,使用前過(guò)濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細(xì)的膜過(guò)濾)。
  8、流動(dòng)相過(guò)濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
  9、不能用純乙腈作為流動(dòng)相,這樣會(huì)使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。
  10、每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。
  11、C18柱絕對(duì)不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。
  12、堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過(guò)濾器→管路過(guò)濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
 ?。?)以異丙醇作溶劑沖洗;
  (2)放在異丙醇中間用超聲波清洗;
 ?。?)用10%稀硝酸清洗。
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